Kas yra Papainas?
Papainas, dar žinomas kaip papainas, yra proteolitinis fermentas. Papainas yra mažo specifiškumo proteolitinis fermentas, esantis Carieapaya. Plačiai jo yra Carieapaya šaknyse, stiebuose, lapuose ir vaisiuose, o daugiausiai yra nesubrendusiame piene. Aktyviame papaino centre yra cisteino ir yra tiolio proteazė. Jis pasižymi dideliu fermentų aktyvumu, geru terminiu stabilumu, natūralia sveikata ir saugumu ir kt., todėl plačiai naudojamas maisto, medicinos, pašarų, kasdienių chemikalų, odos ir tekstilės pramonėje. taikymas.
Papaino struktūra ir cheminės savybės
Nesubrendusiuose papajų vaisiuose yra įvairių proteolitinių fermentų, tokių kaip papainas, Chimopapainas A, Chym opapainas B ir Papajos peptidazė B. Yra žinoma, kad keturių cisteino proteazių pirminės struktūros turi aukštą homologijos laipsnį. Tarp jų, papainas yra tiolio proteazė, galinti hidrolizuoti arginino ir lizino karboksilo galą baltymuose ir peptiduose ir pirmiausia gali hidrolizuoti tas aminorūgštis arba aromatines L-aminorūgščių peptidines jungtis, kurių N-gale yra dvi karboksilo grupės. peptidinė jungtis.
Papainas yra proteolitinis fermentas, kurio molekulinė masė yra 23 406 ir susideda iš vienos peptidinės grandinės, kurioje yra 212 aminorūgščių liekanų. Aktyviajame fermento centre yra mažiausiai trys aminorūgščių liekanos. Tai yra Cys25, His159 ir Asp158. Kai Cys25 oksiduojasi oksidatoriais arba sujungiamas su metalo jonais, fermento aktyvumas slopinamas, o reduktorius cisteinas (arba sulfitai) arba EDTA gali atkurti fermento aktyvumą. Kitos šešios cisteino liekanos sudarė tris poras disulfidinių jungčių ir nė vienos iš jų nebuvo aktyvioje vietoje. Gryno papaino gaminiuose gali būti: (1) papaino, kurio molekulinė masė 21,000, kuris sudaro maždaug 10 % tirpių baltymų; (2) chimotripsinas, molekulinė masė 26,000, sudaro maždaug 45 % tirpaus baltymo; (3) lizocimas, molekulinė masė 25,000, sudaro apie 20 % tirpių baltymų; ir įvairūs fermentai, tokie kaip celiulazė.
Papainas yra proteazė, galinti skaidyti baltymus rūgštinėje, neutralioje ir šarminėje aplinkoje. Jo išvaizda yra nuo baltos iki šviesiai geltonos spalvos milteliai, šiek tiek higroskopiški; papainas tirpsta vandenyje ir glicerine, o vandeninis tirpalas yra bespalvis arba šviesiai geltonas, kartais pieno baltumo; jis beveik netirpsta organiniuose tirpikliuose, tokiuose kaip etanolis, chloroformas ir eteris. Papainas yra sulfhidrilo (-SH) turinti endopeptidazė, turinti proteazės ir esterazės aktyvumą, platų specifiškumą ir stiprią hidrolizės savybę gyvūniniams ir augaliniams baltymams, polipeptidams, esteriams, amidams ir kt. Tačiau jis sunkiai gali suskaidyti peptoną. Tinkamiausias pH papaino vertė yra nuo 6 iki 7 (paprastai priimtina nuo 3 iki 9,5), jis taip pat veikia neutraliomis arba rūgštinėmis sąlygomis. Izoelektrinis taškas (pI) yra 8,75; tinkamiausia papaino temperatūra yra nuo 55 iki 65 laipsnių (paprastai ji gali būti nuo 10 iki 85 laipsnių), jis turi stiprų atsparumą karščiui ir nebus visiškai išjungtas esant 90 laipsnių; jį slopina oksidatoriai, o aktyvina redukuojančios medžiagos.
Papaino gamybos būdas
Neapdorotas produktas gaunamas ekstrahuojant emulsiją iš nesubrendusių papajų vaisių, juos koaguliuojant, nusodinant ir džiovinant. Bendroje pramonėje daugiausia naudojami neapdoroti produktai. Yra trys papaino gamybos būdai: tiesioginis džiovinimas karštu oru, purškiamas džiovinimas ir membraninis atskyrimas šaldant.
1.Išdžiovinkite tiesiogiai
Gamybos metodas yra gana paprastas ir greitas, tačiau gatavas produktas yra tik neapdorotas fermentas, turintis daug priemaišų, prastos spalvos, per daug mikroorganizmų ir mažo fermento aktyvumo, tik nuo 600,{1}} iki 800,000 vienetų. /g. Dažniausiai naudojamas atskirose gamyklose, nebegali atitikti maisto kokybės, higienos ir saugos reikalavimų.
2.Džiovinimas purškiant
Šis metodas pirmiausia pašalina kai kurias priemaišas centrifuguojant, o tada išdžiovina purškiant. Pagaminto gatavo fermento aktyvumas yra gana didelis, siekia apie 1 mln. vienetų/g, palyginti nedaug priemaišų ir santykinai baltos spalvos. Tačiau purškiamas produktas lengvai prilimpa prie sienelės, todėl labai prarandamas fermentų aktyvumas, santykinai blogas tirpumas vandenyje ir prastas fermentų aktyvumo stabilumas.
3.Membranos atskyrimas
Šis gamybos būdas ne tik leidžia išvengti minėtų dviejų metodų trūkumų, bet ir pasižymi higienišku bei saugiu gamybos procesu bei dideliu derlingumu. Pagaminto produkto fermentinis aktyvumas yra mažas, o fermento aktyvumas paprastai gali siekti 2,8–3,5 mln. vienetų/g, daugiausia 4 mln. vienetų/g, geras fermentų aktyvumo stabilumas, didelis grynumas, balta spalva, mažas. bakterijų skaičius, o griežtas veikimas gali pasiekti farmacinį laipsnį.
Ekstrahavimo proceso sąlygos yra 300 W ultragarso galia, 200 s apdorojimo ultragarsu laikas ir 30 % masės dalis. Po ultragarso sustiprinto ekstrahavimo fermento aktyvumas padidėja iki 1,71 karto didesnio nei pradinis; fermento aktyvumas yra mažesnis nei 40 laipsnių, o pH yra nuo 5,4 iki 6,0. Santykinai stabilus; EDTA, Cys ir vitaminas C aktyvina fermentų aktyvumą, CuS04 ir ZnCl2 – slopinamąjį poveikį, o KCl, NaCI, CaCl2 ir MgS04 mažai veikia fermentų aktyvumą.
Papaino atskyrimo ir gryninimo procesas: naudojant išankstinį surinkimo apdorojimą, 20% ir 40% amonio sulfato frakcinį nusodinimą, SP-sephadexC50 kolonėlės chromatografiją ir hidroksiapatito kolonėlės chromatografiją, papainas atskiriamas ir išvalomas iš papajos pieno. Galima gauti gryną fermentą, kurio specifinis aktyvumas yra 1184 U/mg, kurio aktyvumo atkūrimo koeficientas yra 55,79%, o grynumas - 99,31%. Tai didelio grynumo papainas.
Papaino taikymo sritis
Food pramone
Maisto pramonėje papainas gali būti naudojamas mėsos minkštinimui, alaus skaidrinimui, sausainių purenimui ir kitiems tikslams.
Alaus skaidrintuvas
Pagrindinė priežastis, kodėl alus šaldytuve tampa drumstas, yra ta, kad aluje esantys baltymai lengvai jungiasi su polifenoliais, sudarydami makromolekulinius kompleksus. Alaus skaidrintuve esantis papainas pasižymi plačiu specifiškumu baltymams, kurie sudaro drumstumą. Jis gali skaidyti didelius molekulinius baltymus į mažas molekules ir pagerinti baltymų ir polifenolių komplekso tirpumą. Kita vertus, papainas yra biologiškai aktyvus baltymas, galintis sudaryti stabilų balansą su polifenoliais, kurie sukelia šaldymo drumstumą aluje, taip užkertant kelią šaldymo drumstumui aluje.
2.Mvalgyti minkštiklį
Papainas gali suskaldyti mėsoje esantį kolageną ir raumenų skaidulas, kad atlaisvintų mėsos struktūrą. Kadangi papainas yra cisteino proteazė, jis gali skaidyti kolageno skaidulas ir jungiamojo audinio baltymus. Jis skaido aktomioziną ir kolageną į mažų molekulių peptidus ir net aminorūgštis, todėl raumenų gijos ir sausgyslių siūlai lūžta, todėl mėsa tampa minkšta ir lygi, o baltymų struktūra supaprastėja, kad žmogaus organizmas būtų lengviau virškinamas ir įsisavinamas po vartojimo. .
3.Sausainių minkštiklis
Fermentinė papaino reakcija naudojama tešlos baltymui skaidyti į mažų molekulių peptidus arba aminoazes, todėl sumažėja tešlos atsparumas tempimui, todėl tešla tampa minkštesnė, plastiškesnė, mažiau elastinga ir lengviau formuojama. Dozavimas skiriasi priklausomai nuo sausainių gamyklos apdorojimo būdo ir baltymų kiekio tešloje. Tyrimai rodo, kad į kilogramą tešlos geriau dėti 0.6-10,000 vnt./g.
Mokslinio tyrimo taikymas
Papainas gali būti naudojamas ląstelių kultūros eksperimentuose ir naudojamas ląstelėms atskirti pirmajame ląstelių kultūros paruošimo etape. 10 minučių apdorojus smulkius audinio gabalėlius fermentais, ląsteles jungianti tarpląstelinė matrica gali būti pažeista; tada naudokite proteazės inhibitorius, kad sustabdytumėte reakciją, kad papainas toliau neskaidytų pačių ląstelių; ir galiausiai naudokite pasteurpipetę audinio gabalėliams suskaidyti į atskirus gabalus. ląstelių suspensija.
Jeigu norite sužinoti daugiau, susisiekitesales@sxytbio.com,Spustelėkite čia, jei norite susisiekti su mumis internetu
